Анализ крови пцр

Содержание

Анализ крови на ПЦР: что это такое? что показывает анализ и как его сдавать?

Анализ крови пцр

Нечасто возникает ситуация, когда за разработку технологии научного исследования, которое потом широко применяется в клинической практике, автор получает Нобелевскую премию. Но именно так произошло с Кэрри Муллисом, который в 1993 году получил Нобелевскую премию по химии.

Итогом его многолетних исканий явился метод полимеразной цепной реакции или ПЦР.

Что это такое? Почему этот способ изучения молекулярных структур так широко стал применяться в медицине, хотя в науке он считается экспериментальным способом? Чтобы разобраться в этом, нужно вспомнить, что такое геном.

Что такое геном?

Известно, что каждое живое существо на планете обладает определенным набором наследственной информации, которая передается от поколения к поколению.

У человека это информация зашифрована в 46 хромосомах, у других живых существ, как животных, так и растений, существует иное количество хромосом.

Но в каждой хромосоме содержатся очень компактно скрученные нити ДНК – дезоксирибонуклеиновой кислоты, которая является гигантской молекулой «биологической памяти».

Именно молекула ДНК хранит закодированную информацию о структуре живой ткани, а точнее — о белках, которые должны синтезироваться. По сути, ДНК представляет собой матрицу, на которой один за другим располагаются участки, отвечающие за синтез отдельных белков.

У каждого живого существа есть свои собственные, уникальные участки этой молекулы, которые не встречаются у другого вида: белки строго видоспецифичны, а их определенная последовательность также уникальна.

Как же можно воспользоваться этой структурой в диагностических целях?

В том случае, если проводится анализ крови ПЦР методом, то можно выделить наследственный материал тех живых существ, которые оставили свои следы в организме человека. Конечно, прежде всего, это возбудители различных инфекционных заболеваний: вирусы и бактерии, грибы и простейшие, другие патогенные формы жизни.

Вся сложность состоит в том, что если в организм человека попало определённое количество возбудителей, например, бактерий, и организм их уже успела разрушить, то в плазме крови сохраняются незначительные обрывки наследственной информации.

Эти обрывки и остатки содержат, в том числе, фрагменты тех самых уникальных последовательностей ДНК, но их нужно каким-то образом сделать узнаваемыми.

Как же получить выявляемые участки генома, которые можно подвергнуть дальнейшему исследованию, и дать ответ, находится ли данный возбудитель в организме, или его остатки? Для этого и разработан метод полимеразной цепной реакции, или анализ крови на ПЦР в медицине. В чём суть метода?

Что такое полимеразная реакция?

Полимераза — это особый фермент, который в соответствующих условиях может многократно умножать, или амплифицировать заданный участок ДНК, копируя его много раз.

Этот метод напоминает человека, который вошел в темную комнату с зеркальными стенами, и зажег в ней фонарик. Многократное отражение луча от стен делает комнату светлой, хотя луч из фонарика по-прежнему выходит один.

Также и фермент ДНК полимераза, позволяет многократно увеличить количество наследственного материала, делая его концентрацию доступной для определения.

Сама технология этой реакции — достаточно тонкий процесс. В начале необходимо задать точную температуру, которая измеряется десятыми долями градусов. Материал, в котором, возможно, находится наследственный материал возбудителей, нагревают до высокой температуры, чтобы разрушить водородные связи внутри двухцепочечной структуры ДНК.

Затем добавляется в раствор ДНК полимераза, особые праймеры, которые крепятся к свободным концам фрагментов ДНК, откуда и начинает работать полимераза, туда же добавляются нуклеотиды — аденин, гуанин, цитозин и тимин, и проводятся определенный технологические процедуры.

В результате на выходе образуется гораздо больше копий с заданными параметрами, чем на входе этой реакции.

Если ДНК полимераза успешно справилась с заданием, то многократно умноженный и достроенный фрагмент сверяется с необходимой базой данных, и затем делается заключение о наличие в организме определённого возбудителя.

Где еще применяется ПЦР?

Не стоит думать, что анализ крови на ПЦР и применение ее в медицине является единственным. Различных способов исследовать наследственный материал методом ПЦР существует много.

Насчитывается более 10 разновидностей полимеразной цепной реакции, например, инвертированная, ступенчатая, с обратной транскрипцией, ПЦР длинных фрагментов, и даже виртуальная ПЦР.

Последняя разновидность есть не что иное, как математический метод компьютерного моделирования, который проводится для предсказания достоверности будущих реакций.

В современной практике полимеразная цепная реакция с успехом применяется в криминалистике, если на месте преступления оставлены биологические материалы. Если есть подозреваемый, то нет никаких проблем с идентификацией принадлежности материала конкретному лицу.

ПЦР диагностика помогает выявить отцовство, а также применяется для клонирования генов, которая необходима в современной медицине для создания моноклональных антител.

Они перспективны как способ лечения лечения злокачественных новообразований, рассеянного склероза, и многих аутоиммунных болезней.

Также это реакция применяется в генетике для секвенирования ДНК, а также для экспериментального мутагенеза, или внесения необходимых исследователям изменений в избранный геном.

Применение в медицине

Расшифровка анализа крови, выполненного методом ПЦР, позволяет быстро и с высокой достоверностью определить наличие в организме пациента возбудителей очень многих заболеваний, которые не растут на искуственных средах.

Чаще всего к ним относятся различные вирусы и «капризные» микроорганизмы.

Это вирусы папилломы и клещевого энцефалита, цитомегаловирусная инфекция и туберкулез, вирусные гепатиты и мононуклеоз, герпетическая инфекция и ВИЧ-инфекция,  микоплазменная и хламидийная инфекция.

Что показывает анализ? Практически всегда он выполняется качественно, и в заключении дается ответ, есть в образце наследственный материал определенного возбудителя, или его нет, человек заражен, или инфицирования не выявлено. Иногда проводится количественное определение, но оно выполняется реже и стоит дорого дороже.

Большим преимуществом является то, что сдавать кровь на ПЦР вполне можно безо всякой подготовки, в отличие от изучения многих биохимических показателей. Кровь сдается, как обычно, без сложностей. В начале XXI века метод ПЦР — золотой стандарт диагностики различных инфекций. Но, как и у любого способа, у метода ПЦР имеются плюсы и минусы.

Плюсы и минусы

Безусловными плюсами этого метода является широкая универсальность. Он может обнаружить очень многих возбудителей, исследовать можно любой биоматериал, от соскобов и до биоптатов тканей, от крови и слюны до мочи и спермы. При необходимой подготовке в одном образце можно сразу поставить реакцию на выявление нескольких возбудителей, провести групповое определение.

Метод ПЦР очень чувствительный, и даже если в исследуемом образце находится всего лишь несколько обрывков ДНК, то можно определить даже раннюю стадию заболевания, включая даже день заражения. Это реакция показана для выявления латентной инфекции, которая никак себя не проявляет, в том числе, если у пациента на фоне иммунодефицита не синтезируются антитела.

Метод ПЦР позволяет проводить быструю диагностику, и уже на следующий день после сдачи анализов получить результат. Наконец, ПЦР — диагностика отличается высокой достоверностью, точностью, и, как показала практика, небольшой стоимостью.

Последнее качество очень важно, поскольку при поиске различных инфекций пациенту приходится платить сразу за постановку реакций для поиска нескольких возбудителей. Поэтому количество ПЦР-исследований в каждой крупной лаборатории очень велико.

Но не существует совершенных методов исследования. Следует помнить, что далеко не каждая лаборатория может себе позволить проведение анализов ПЦР. Необходим специальный прибор, в котором ставится реакция, и он называется амплификатор.

Профессионализм специалистов лаборатории должен быть очень высоким, соблюдение технологии — безукоризненным, а чистота в лаборатории должна быть абсолютной. Также предъявляются высокие требования к чистоте и исходного образца.

В том случае, если берется кровь, то необходимо тщательно обработать кожу, иначе в кровь могут попасть частицы микроорганизмов, которые находятся на ее поверхности. Это же относится и к другим образцам, например, смывам из носоглотки, или к вагинальным мазкам.

Вам могут быть также полезны статьи по этой теме:

Источник: https://MyAnaliz.ru/blood/analiz-krovi-na-ptsr

Что такое анализ ПЦР?

Анализ крови пцр

На сегодняшний день выявлено множество инфекционных заболеваний, возбудители которых моментально приспосабливаются к меняющимся условиям, из-за чего их диагностика затрудняется.

Поэтому одновременно с уже привычными морфологическими, биохимическими и иммунологическими методами врачи активно внедряют новейшие разработки в диагностику, чтобы получить еще более точные результаты.

За открытие полимеразно-цепной реакции американский ученый К. Мюллис получил Нобелевскую премию.

Что это за исследование?

Метод ПЦР считается одним из уникальных методов молекулярной биологии, обладающих высочайшей точностью.

Технология позволяет увеличить в сотни раз в биоматериале участок ДНК возбудителя патологии. Таким способом можно выявить даже одну чуждую ДНК. В основе теста лежит многократное удвоение какого-либо сегмента ДНК ферментами.

В результате увеличения количества ДНК становится достаточно для точной идентификации. Копируется при этом только участок удовлетворяющий заданным требованиям.

Полученные фрагменты сверяются с базой данных, выявляется тип возбудителя и его концентрация.

ПЦР позволяет в самом маленьком объеме материала обнаружить присутствие возбудителя и начать курс терапии как можно раньше.

Материалом служат любые биожидкости: кровь, моча, слюна, секрет, биоптат.

Достоинства и недостатки исследования

У ПЦР тестов много преимуществ перед традиционными способами:

  • высокая чувствительность — патологичный возбудитель выявляется даже на самых начальных этапах болезни, при её хронической форме и при латентном протекании болезни;
  • универсальность — определить возбудителя можно в любом биоматериале: в крови, в слюне, в соскобе с кожи;
  • высокая специфичность — определяется последовательность нуклеотидов, характерная лишь для конкретного возбудителя. Специфичность ПЦР достигает 100%;
  • широкий охват — в одном образце можно выявить нескольких возбудителей;
  • быстрота — результат бывает готов уже через 5–7 часов;
  • точность — способ практически не дает ложноположительных/отрицательных результатов при точном соблюдении технологии исследования;
  • доступная стоимость — анализ крови ПЦР не дороже других исследований.

Конечно, есть у способа и свои недостатки.

Этот тест нуждается в соблюдении строгих норм оснащения лаборатории. Например, в лаборатории должен находиться биофильтр со степенью очистки не менее 99,9%. Это необходимо потому что в воздухе постоянно летают множество фрагментов посторонних ДНК, которыми может загрязниться исследуемый фрагмент.

Посмотрите видео на эту тему

При помощи ПЦР анализа можно выявить:

  • ВИЧ;
  • герпес;
  • ИППП — хламидиоз, микоплазмоз, гарднереллез и пр.;
  • кандидоз;
  • гепатиты;
  • туберкулез;
  • ВПЧ;
  • листериоз;
  • мононуклеоз;
  • цитомегаловирус;
  • клещевой энцефалит;
  • энтеровирус;
  • краснуху;
  • опоясывающий лишай.

Это не абсолютный список, ПЦР-анализ используется в различных сферах медицины, в том числе в судебной, в криминалистике, в агроветеринарии.

Разновидности

Существует достаточно много разновидностей ПЦР: в реальном времени, RPA, вложенная, инвертированная, асимметричная, с обратной транскрипцией, ступенчатая, длинных фрагментов и пр.

Наиболее часто используется техника ПЦР в реальном времени — при исследовании этим способом практически не бывает ложных положительных заключений, вдобавок срок обработки биоматериала сокращается до нескольких часов.

ПЦР на инфекции

ПЦР активно используется для диагностирования ЗППП. Коварство этих недугов проявляется в том, что симптоматика преобладающего количества стерта, особенно на начальных этапах инфицирования. Выявить возбудителя при помощи классических анализов сложно.

Когда же симптомы проявляются, лечение будет более длительным. Поэтому исследование рекомендуется проводить при первых подозрениях на инфицирование. ЗППП опасны тем, что они отрицательно влияют на здоровье партнерши и на ее потомства. Сдать ПЦР на ЗППП рекомендуется молодым супругам перед зачатием.

Только ПЦР сможет выявить скрыто протекающие инфекции.

ПЦР во время беременности

Большинство заболеваний у женщин, ожидающих ребенка, протекает без симптомов и принимаются за недомогания.

Для выявления скрытых инфекций рекомендуется проводить ПЦР до 12-ой недели беременности, чтобы была возможность лечения до родов.

Через три недели после терапии проводится повторный анализ для оценки его эффективности. ПЦР-проба используется для определения ограниченного перечня инфекций:

  • токсоплазмоза;
  • трихомониаза;
  • кандидоза;
  • микоплазмоза;
  • хламидиоза;
  • гонореи;
  • герпеса;
  • гепатита;
  • ВИЧ и пр.

Важно понимать, что болезненная микрофлора беременной может вызвать:

  • дефекты развития эмбриона;
  • прекращение беременности;
  • вызвать ранние роды.

Для диагностики ВПЧ

ПЦР — самый, пожалуй, распространенный метод диагностики для выявления ВПЧ особенно онкогенных типов.

Некоторые исследователи считают, что больше 80% населения мира инфицированы этим вирусом.

В качестве материала для анализа берется мазок со слизистой, в некоторых случаях — кровь, моча или околоплодные воды. ПЦР-анализ позволяет не просто выявить ВПЧ, но и уточнить тип инфекции.

Метод позволяет точно посчитать даже количество вируса в предоставленном материале. Цифра в бланке показывает количество геномов на 100000 клеток.

Если вируса нет, в заключении будет слово — отрицательный. Если он присутствует, то в результатах будет прописана его концентрация.< 3 — вирус есть, но его мало, 3–5 — клинически значимый результат, > 5 — высокая вирусная нагрузка.

Исследование на ВПЧ делается всего за 4-5 часов, поэтому в крупной лаборатории с результатами можно ознакомиться в день сдачи.

Для диагностики ВИЧ

Известные тесты ПЦР для диагностирования ВИЧ чувствительны лишь в 96-98%, что принципиально меньше, чем при сдаче ИФА (99,9%). Поэтому их нельзя использовать для подтверждения диагноза.

Неудачный подбор праймеров (используемых ингредиентов) может приводить, например, к тому, что тест выявит субтип B вируса иммунодефицира и не выявит субтип A и G и пр.

Преимущество ПЦР состоит в том, что тест может выявить вирус в инкубационном и в раннем периоде, когда еще нет антител. Однако, тест реже показывает инфицированных в позднем периоде.

Главным отличием ПЦР теста можно считать тот факт, что тест выявляет не антитела (которых еще часто нет), а наличие непосредственно самого вируса. Поэтому ПЦР можно назвать оптимальным способом, если требуется преждевременное выявление ВИЧ.

Можно отдельно отметить значение ПЦР для диагностики ВИЧ у малышей 1-го года жизни, в крови которых еще присутствуют антитела матери.

Для диагностики гепатитов

ПЦР проба на гепатит C, B, G, D – самый эффективный сегодня метод для определения вируса. ПЦР решает задачи:

  • диагностирует инфекции на начальных стадиях;
  • указывает на отсутствие вирусов при неопределённых результатах ИФА;
  • выявляет истинных вирусоносителей среди людей с антителами;
  • позволяет выяснить генотип вирусов гепатита С;
  • провести количественный анализ ДНК вируса.

Комплексное обследование

Комплексный ПЦР-анализ на 6-20 инфекций рекомендуется в тех случаях, когда человек подозревает, что он мог заразиться, но не знает чем.

Комплексный анализ будет полезен парам, планирующим ребенка, и людям часто меняющим сексуальных партнеров. Комплексное обследование поможет выявить возбудителей уреаплазма, ВПЧ, кандида, микоплазмы, хламидии, герпеса и пр.

Пациент получает на руки результат по всем возбудителям, по их наличию/отсутствию в организме.

Подготовка к исследованию

Подготовка зависит от того, какой биоматериал нужно сдать.

  1. Анализ крови на ПЦР сдается натощак, после, как минимум, 4-х часового воздержания от еды. За час до кровосдачи нельзя курить. За 2 дня нужно исключить физнагрузки, алкоголь и жирные, жареные продукты из рациона.
  2. Сдаче мочи не должна предшествовать антибиотикотерапия. Накануне нельзя ограничиваться в питье и не пить чересчур много питья, чтобы не была повышена/понижена её концентрация. Не злоупотреблять окисляющими мочу продуктами (мясо, фрукты) или ощелачивающими (бобовые, овощи). Необходимо исключить накануне сексуальные контакты. Перед сдачей мочи подмыться только водой без мыла. Женщинам — не сдавать мочу в течение 5 дней после проведения трансвагинального УЗИ и кольпоскопии. Мочу нельзя сдавать в период менструации.
  3. Перед сдачей мазка нужно воздержаться от секса в течение 36 часов. Перед мазком нельзя подмываться и мочиться (с момента посещения туалета должно пройти больше 3 часов). Мазок женщинам нельзя сдавать во время кровотечений и месячных. Для более высокой достоверности мазок берут или за несколько дней до менструации или сразу после. В день сдачи нельзя спринцеваться и ставить вагинальные свечи. Если анализ проводится для контроля антибиотикотерапии после лечения должно пройти не меньше 21 дня.
  4. Перед сдачей мазка из рото- и носоглотки за 2-4 часа нельзя кушать, в течение часа нужно воздержаться от курения. С утра не нужно чистить зубы, полоскать рот, промывать носовые ходы. Также нужно воздержаться от применения капель, спреев и аэрозолей.

Кровь сдается из вены с использованием вакуумных систем.

Мочу нужно собрать в стерильный контейнер и в течение часа доставить в лабораторию. Транспортировку контейнера нужно осуществлять только при плюсовой температуре.Мазок берется из уретры у мужчин и из влагалища, мочевого канала и шейки матки у женщин. Мазок берется специальным зондом, не повреждающим слизистую.

Собранный биоматериал помещается в контейнер.

Какой материал исследуется?

Биоматериалом для ПЦР проб служат:

  1. Эпителиальные соскобы берутся для определения наличия ЗППП, герпетических и иных инфекции, поражающих эпителиальный слой.
  2. Моча необходима для исследования при инфекциях мочеполовой системы.
  3. Мокрота берется для выявления туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза.
  4. Кровь и плазма необходимы для исследования вирусов гепатитов, герпеса, ВИЧ.
  5. Биожидкости — к ним относятся сок простаты, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости и пр.
  6. Биоптаты желудка и ДПК для определения Helicobacter pylori.

Расшифровка и нормы

Расшифровка результатов не представляет сложности даже для неспециалиста, так как таблицы норм не существует. В заключении могут быть только два показателя:

  • отрицательный – значит возбудитель, для выявления которого проводилась проба, не найден;положительный – найден;
  • ПЦР может быть положительным даже в случае, когда симптомов не наблюдается. Это означает, что она протекает в начальной стадии или скрыто.

Точность диагностики

Тест отличается исключительной уникальной точностью. Анализ способен:

  • точно определить наличие/отсутствие инфекции;
  • идентифицировать её;
  • обнаружить её при минимальном количестве ДНК возбудителей в биоматериале.

В отличие от ИФА и прочих распространенных иммунологических методов, ПЦР намного реже дает ложноотрицательные результаты и никогда не дает ложноположительные.

Где пройти исследования

Анализы на ПЦР в Москве выполняются медицинскими профильными клиниками, оборудованными соответствующими лабораториями, к которым относятся:

  • Семейный Доктор;
  • IQ-clinic;
  • Вита;
  • сети лабораторий Инвитро и Гемотест;
  • Милта Клиник;
  • МЦ Здоровье Основа Всего;
  • Мед-диалог и пр.

Стоимость исследования на одну инфекцию колеблется от 200 рублей до 350. К стоимости исследования нужно прибавить стоимость забора материала. Как правило, при комплексном ПЦР стоимость одного исследования обходится дешевле.

Еще дешевле можно обследоваться в периоды проведения клиниками акций.

Вывод

На сегодняшний день анализ ПЦР является наиболее точным и современным методом для выявления инфекций на самых ранних стадиях инфицирования. Одинаково эффективен он при обследовании и взрослых и детей.

Читайте так же:  Важная информация про осмолярность крови

Источник: http://1pokrovi.ru/analizy-krovi/pcr.html

Анализ ПЦР: что это такое, что показывает кровь, расшифровка исследования, подготовка и как сдавать

Анализ крови пцр

Современные методы диагностики заболеваний постоянно совершенствуются и дополняются новыми способами получения информации о состоянии здоровья пациентов. Анализ ПЦР признан одним из самых точных и надежных медицинских тестов. Этот способ лабораторного исследования был запатентован в 1983 году, а его создатель Кэри Муллис, удостоен Нобелевской премии за свое открытие.

Для чего используется ПЦР

Что такое ПЦР? Полимеразная цепная реакция представляет собой специфическое исследование, которое используется медиками всего мира.

Микробиология располагает обширной информацией о строении вирусов и бактерий, которые являются возбудителями серьезных заболеваний. В качестве исследования используется ПЦР РНК вирусов, антитела ВПГ и пр.

Анализ крови ПЦР помогает выявить до 12 различных заболеваний.

Каждое исследование может проводиться отдельно по клиническим показаниям. Существует и комплексное обследование, известное как «ПЦР-12». В этом случае профилактический анализ проводится на каждую болезнь, которую может выявить ПЦР.

  • РНК HCV и другие типы гепатита
  • Определение заболеваний, передающихся половым путем (хламидиоз, уреплазмоз, папиллома и пр.)
  • Мононуклеоз инфекционной природы (вирус Эпштейна-Барра)
  • ВИЧ
  • Герпес
  • Онковирусы (опухолеродные вирусы, вызывающие рак)
  • ЦМВИ (исследование на цитомегаловирус)
  • Листериоз
  • Энцефалит
  • Туберкулез
  • Кандидоз (молочница)
  • Хеликобактерная инфекция (приводит к болезням желудка)

Иногда медицинские учреждения проводят так называемый скрининг, выборочное исследование, которое направлено на географическую область или район города. Многий из этих скринингов позволяет предотвратить вспышки эпидемий вирусов. ПЦР и анализатор заболеваний используется для выявления заразных типов болезней, например, вирусного гепатита.

Сдать анализы можно по собственной инициативе, обратившись к участковому терапевту за направлением. Выявление вирусного ДНК для ПЦР не является проблемой. Отрицательный результат исследования может успокоить даже мнительного пациента.

Особенности проведения анализа

Сдать кровь на ПЦР можно в районной поликлинике или частной лаборатории. Для того, чтобы выбрать, где сделать анализ, следует обратить внимание на техническую оснащенность медицинского учреждения.

Старое оборудование может существенно снизить достоверность анализа.

Высокое качество исследования, как правило, может гарантировать только коммерческое учреждение, оснащенное современным лабораторным оборудованием.

Качественный анализ ПЦР проводится быстрее и стоит дешевле количественного. Однако, готовый результат количественного теста дает врачу больше информации в случае, если пациент заражен. Любой тип данного исследования способен выявить наличие болезни.

ПЦР во время скрытого течения заболевания способен обнаружить вирус, даже при отсутствии явных клинических симптомов и жалоб со стороны пациента.

Проводится исследование в медицинской лаборатории. В качестве химического реагента используются специальные ферменты, которые способны увеличивать ДНК и РНК структуры биологического образца пациента.

Этот метод позволяет лаборанту визуально определить наличие вредоносных клеток. Полученные данные сверяются с базой данных инфекционных агентов и заболевание идентифицируется.

Также возможен подсчет количественного соотношения возбудителя болезни.

После сдачи биологического образца, лаборант укажет время проведения теста и, через сколько дней можно будет получить результат.

Срок проведения исследования зависит от типа инфекции и может составлять 1 день или затянуться до 5 дней. Готовность результата исследования зависит от оснащенности и загруженности лаборатории.

Анализ ПЦР и расшифровка результатов должны проводиться квалифицированными медицинскими работниками.

Биоматериал для исследования

Чтобы понять, как берут анализ ПЦР, следует знать, какой именно биологический материал подлежит исследованию. Самым распространенным способом проведения анализа является анализ крови из вены.

В большинстве случаев на исследование крови не влияют внешние факторы, такие как рацион питания или особенности ежедневного распорядка. Однако многие врачи рекомендуют не перегружать организм и сдавать образец крови натощак.

Антибактериальные препараты могут исказить результат исследования.

ПЦР диагностика инфекций в гинекологии проводится, как правило, через мазок со слизистой поверхности. Как берется образец? Мазок берет лечащий врач после проведения осмотра. Сделанный мазок помещается в специальную емкость и передается в лабораторию. Для женщин имеются следующие показания для анализа мазка: причина бесплодия, осложнения во время беременности, острая форма ЗППП.

Для анализа мочи и кала используются специальные стерильные емкости с крышкой. Дополнительно вытирать или мыть покупные контейнеры для анализов не нужно. Во время сбора образца нельзя задевать руками или посторонними предметами внутренние стенки емкости. Дополнительные средства (клизмы и пр.) использовать не рекомендуется.

В материале не должно быть посторонних веществ, поэтому использование свечей, слабительных и мочегонных средств рекомендуется прекратить за неделю до теста. Анализ проводится в течение 4-5 часов и позволяет выявить патогенные микроорганизмы.

Высокая точность исследования позволяет обнаружить даже одну болезнетворную клетку в биологическом образце пациента.

Как сдать анализ

Анализ крови на ПЦР сдается из вены, в лабораторных условиях, строго натощак. Сдача другого биоматериала проводится в лаборатории, кабинете лечащего врача или в домашних условиях.

Где сдать образец для анализа расскажет лечащий врач при оформлении направления. Перед сдачей биологического образца необходима подготовка пациента.

Общим требованием является отсутствие физических и психоэмоциональных нагрузок на организм в течение 2-3 дней до теста. Как правильно сдать анализы на ПЦР подскажет лечащий врач.

Подготовка к ПЦР исследованию крови включает в себя отказ от алкоголя за 48 часов до сдачи образца. Кровь берется натощак, перед тестом разрешается пить только чистую воду.

Если одновременно проводится биохимическое исследование, то правила подготовки к исследованию более строгие.

Многих пациенток интересует вопрос, можно ли сдавать анализы, во время месячных? Это зависит от биологического образца. Гинекологический мазок и анализ мочи следует сдавать, когда менструация закончится. На кровь, слюну и другие образцы менструальный цикл женщины не влияет.

Анализ мочи и кала должен браться дома, в лабораторию сдаваемый материал поступает в специальном контейнере. Перед сдачей на ПЦР кала следует прекратить прием лекарств, влияющий на цвет фекалий. За сутки до сдачи материала рекомендуется исключить сексуальные контакты, антибактериальные препараты прекращают принимать за 2-3 недели до теста. Мочу сдают натощак.

Результат исследования

Врач может назначить качественный или количественный лабораторный тест. Что показывает анализ? Данный тип лабораторного исследования используется для диагностики инфекционных и вирусных заболеваний.

Результат позволяет врачу определить, болен человек или здоров. Результаты ПЦР отличаются высокой точностью и специфичностью. В большинстве случаев это простой отрицательный или положительный ответ, который понятен и человеку без медицинского образования.

Но существуют и некоторые особенности расшифровки результата.

  • ПЦР отрицательный значит, что в исследуемом материале не обнаружено следов болезни.
  • ПЦР качественный показывает наличие или отсутствие вирусов в биоматериале, но не их количество.
  • Результат количественного исследования дает информацию о количестве вирусов, присутствующих в организме. Этот же тест определяет фазу заболевания (хроническая, стадия обострения, острая).

Интерпретация результатов проводится лечащим врачом. В некоторых случаях, положительная реакция не означает, что пациент болен. Возможно и «здоровое» носительство вируса.

Получение ложноотрицательного результата возможно в том случае, если инфекция уже попала в организм, но еще не начала активное заражение.

В 5% случаев результат анализа бывает ошибочным из-за несоблюдения пациентом рекомендаций по подготовке к исследованию или ошибочных действий сотрудника лаборатории.

Преимущества метода

ПЦР является самым современным и точным способом диагностики, доступным на сегодняшний день. Стоимость исследования достаточно высока. Крупные лаборатории, как правило, предоставляют скидку при комплексном обследовании.

Например, «ПЦР-12» на исследование 12 различных параметров будет стоить дешевле анализа на каждый из параметров отдельно.

Анализ имеет ряд неоспоримых преимуществ перед другими методами диагностики:

  • Определение уникального участка цепи РНК инфекции позволяет безошибочно идентифицировать возбудителя болезни.
  • Универсальная методика проведения исследования дает возможность выявить сразу несколько болезней в одном биологическом образце пациента.
  • ПЦР тест способен определить наличие заболевания еще до появления клинических симптомов и жалоб у пациента, что дает возможность начать лечение как можно раньше.
  • Метод отличается высокой чувствительностью. Тест выявляет даже единичные клетки возбудителей заболеваний.
  • Постоянное совершенствование обработки биологических образцов ежегодно улучшает качество проводимых исследований.

Анализ на ПЦР или полимеразную цепную реакцию обычно назначают при обнаружении симптомов заболевания ил после контакта с больным человеком. Этот тест способен показать наличие вируса даже, когда симптомы заболевания отсутствуют.

Любой человек, обратившись к терапевту, может пройти этот простой и достоверный анализ. Расшифровку анализа ПЦР проводит квалифицированный врач.

Справка об отсутствии заболевания может быть действительна в течение нескольких недель или месяцев в зависимости от типа инфекции.

Источник: https://krov.expert/analiz/ptsr.html

Анализы методом ПЦР

Анализ крови пцр

Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. “Иглой” является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Таким образом, открытие этого метода – одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода – многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.

Пцр в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций – один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими).

Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР – самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей.

Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования).

Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .

Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса.

Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми.

Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.

Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя.

Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно.

Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

Пцр в диагностике вич-инфекции

В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход – обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

  1. Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
  2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
  3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
  4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.

2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализы ПЦР?

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

Источник: https://www.cmd-online.ru/analizy-i-tseny/polimeraznaja-cepnaja-reakcija-pcr/

Анализ крови на ПЦР – что это такое, суть метода, показания к назначению, расшифровка анализа крови ПЦР

Анализ крови пцр

Диагностика инфекционных заболеваний – бактериальных и вирусных – направлена на раннее выявление возбудителей, что позволяет назначать раннюю и максимально эффективную терапию. Самым современным способом диагностики инфекций является ПЦР или полимеразная цепная реакция. Так что же это за метод, и для чего он нужен?

Суть полимеразной реакции

Любой микроорганизм и вирус содержат в своей структуре молекулы ДНК или РНК. У каждого из них эти соединения уникальны, поэтому, если выделить в анализе крови у детей или взрослых нуклеиновые кислоты, можно с абсолютной точностью поставить диагноз.

К сожалению, концентрация ДНК в образцах крови или других биологических материалах достаточно низка и с помощью обычных методов диагностики определить ее не получается. Чтобы справиться с этой проблемой, была изобретена полимеразная цепная реакция.

Сущность ПЦР заключается в специальной обработке образца крови, в результате чего в ней увеличивается концентрация ДНК молекул, определение типа которых в дальнейшем позволяет установить вид возбудителя и поставить диагноз.

Как сдать кровь на ПЦР

При подготовке к анализу следует придерживаться общих рекомендаций: не пить и не есть непосредственно перед анализом крови. Хотя для сдачи крови на ПЦР можно так строго не придерживаться этих требований, так как точность исследования не зависит от того, на сытый или голодный желудок был взят анализ.

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР

С помощью ПЦР можно выявить практически любые вирусные и бактериальные заболевания.

Для анализа используется не только кровь, но и другие биологические материалы: сперма, слюна, мазки из уретры и с шейки матки.

Анализ крови будет информативен в том случае, если возбудитель конкретного заболевания проникает в кровь человека. Поэтому ПЦР крови назначают при следующих заболеваниях:

  • вирусные гепатиты А, В, С, D и TT;
  • цитомегаловирус;
  • герпетическая инфекция (вирусы герпеса 1, 2 и 4-го типов);
  • ВИЧ-инфекция
  • энтеровирусная инфекция;
  • опоясывающий лишай;
  • краснуха;
  • токсоплазмоз;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • листериоз.

Если же взять во внимание возможность проведения ПЦР других биоматериалов, то в список заболеваний, выявляемых с помощью ПЦР, следует добавить:

Особо актуально в настоящее время ПЦР анализа крови беременной на так называемые TORCH-инфекции: цитомегаловирус, токсоплазмоз, краснуху и герпесвирусную инфекцию. Связано это с тем, что упомянутые заболевания могут привести к аномалиям развития плода.

Преимущества ПЦР

  1. 100% точность диагностики – если в крови есть даже несколько фрагментов ДНК возбудителя, с помощью ПЦР они буду выявлены, и будет поставлен точный диагноз. Это главное отличие данного метода от других способов диагностики – ИФА, общего анализа крови и прочих.
  2. Специфичность. При проведении ПЦР отсутствует такое понятие, как ложноположительный или ложноотрицательный результат.

    В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА).

  3. Возможность проведения анализа сразу на несколько возбудителей из одного образца биоматериала, что делает метод удобным для пациента – не нужно несколько раз сдавать анализ.
  4. Быстрота. Не нужно выделять и выращивать возбудителя на питательных средах, как это делается при бактериологическом исследовании.

    Результат может быть готов уже в день сдачи анализа.

  5. С помощью ПЦР выявляют возбудителей латентных заболеваний, когда возбудитель в организме есть, но он еще не вызвал заболевание, или когда пациент является носителем инфекции (гепатита или ВИЧ).
  6. Низкая стоимость. Цена анализа ПЦР на одного возбудителя составляет 250-500 рублей.

    Чуть дороже стоит полуколичественный анализ на вирусы – около 1000 рублей.

Недостатки анализа

ПЦР является высокотехнологичным методом исследованием и предъявляет высокие требования к оснащению лаборатории.

Помещение, где делают анализ, обязательно должно быть оснащено фильтром биологической очистки, так как в воздухе постоянно присутствуют частицы кожи, слюны, содержащие в своем составе молекулы ДНК.

Несоблюдение техники работы с биоматериалами может стать причиной неверного результата.

Анализ крови – расшифровка у взрослых (ПЦР)

Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы:

  • отрицательный результат – возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен;
  • положительный результат – в организме имеется возбудитель указанного заболевания.

Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых.

Кому нужно сдать анализ на ПЦР

Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем (хламидиоз, гарднереллез, ВИЧ-инфекция).

При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. В обязательном порядке кровь на TORCH-комплекс сдают беременные женщины.

А также женщины, только планирующие беременность.

Хотя ПЦР является максимально эффективным методом диагностики, зацикливаться только на нем не стоит. Обследование пациента при любом заболеваний должно носить комплексный подход.

Если цепная полимеразная реакция позволяет выявить возбудителя, то серологическое исследование позволяет оценить эффективность лечения, реакцию организма на возбудителя и лекарства.

Назначать все исследования должен врач по показаниям.

Увидеть, как выполняется анализ крови ПЦР,  вы сможете, просмотрев данный видео-обзор:

Гудков Роман, врач-реаниматолог

25,943  1 

(60 голос., 4,20 из 5)
Загрузка…

Источник: https://okeydoc.ru/chto-takoe-analiz-krovi-na-pcr-i-zachem-on-nuzhen/

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.